Práctica LXII: DETERMINACIÓN DE UN Du

Fundamento

El Du es un antígeno d débil que no se pone de manifiesto en las pruebas normales de determinación del RH por ello debemos sensibilizar previamente los hematíes problema con un suero que contiene anticuerpos anti D y posteriormente enfrentarlos al suero de Coombs

Sí existe el antígeno Du en la superficie de los eritrocitos se producirá la unión de los anticuerpos anti D a sus receptores de membrana y en la segunda fase darán lugar a la alucinación en presencia del suero antiglobulina humana es una prueba de Coombs indirecta

material necesario

tubos de centrífuga o de hemólisis
centrífuga
pipetas Pasteur
gradilla
baño de agua
reloj

reactivos

suero anti D humano
suero antiglobulina humana de conejo suero de Coombs
solución salina fisiológica

muestra

hematíes de la sangre problema previamente lavados tres veces en solución salina fisiológica y suspendidos 5 por ciento en dicha solución

técnica


en un tubo de hemólisis colocamos una gota de suero anti D y una gota de la suspensión de hematíes al 5 por ciento

mezclamos suavemente E incubamos durante 30 o 45 minutos

después de incubar lavamos los hematíes en solución salina después del último lavado

añadimos sobre el sedimento hemático una gota de suero de Coombs y mezclamos suavemente

centrífugamos el tubo a 1000 revoluciones durante un minuto

lectura de resultados

observamos la aparición Ono de aglutinación mediante golpes suaves en el fondo del tubo en caso de duda observamos al microscopio entre porta y cubre con el objetivo de 40X.


interpretación clínica de los resultados obtenidos

si existe aglutinacion el resultado es positivo. Indica que en la membrana de los hematíes antígeno d u y se clasifica la sangre como Rh positivo varianted u

en el caso de no existir aglutinacion se clasifica la sangre como Rh negativo para evitar falsos positivos debido a una sensibilización previa de los hematíes in vivo. debemos realizar una prueba de Coombs directa con los hematíes problema

esto nos servirá como control negativo


valoración de los resultados

la sangre es Rh positivo