fundamento
el suelo de un individuo sólo debe contener anticuerpos frente a los antígenos que no están presentes en sus propios hematíes .
por ello al hacer reaccionar este suero con hematíes conocidos del grupo A y del grupo B sólo producirá aglutinacion sólo produciráaglutinacion en el caso de ser enfrentado a eritrocitos con antígenos distintos a los de sus propios hematíes
esta técnica puede realizarse tanto en porta como un tubo, aunque se prefiere la determinación en tubo porque la centrifugacion de los hematíes intensifica el fenómeno de aglutinacion.
material necesario
tubos de centrífuga
pipetas Pasteur
baño de agua
centrífuga
reloj
rotulador de vidrio
gradilla
reactivos
hematíes del grupo A1
hematíes del grupo A2
hematíes del grupo B
hematíes del grupo 0
hematíes de la sangre problema
muestra
suero obtenido mediante coagulación de la sangre en baño de agua a 37 grados durante 20 a 30 minutos
posteriormente centrífuga Moss durante 10 minutos a 3000 revoluciones por minuto y extraemos el sobrenadante con ayuda de una pipeta Pasteur
técnica
para evitar falsos negativos por la presencia de complemento activo en el suero, es aconsejable la inactivación previa de la muestra. Esto se realiza manteniendo el suero en un baño de agua a 56 grados 10 minutos
con esto evitamos los fenómenos de hemólisis debido al cumplimiento
la vamos tres veces los hematíes propios de la sangre problema con solución salina isotónica según la técnica descrita en la prácticala 28 Posteriormente preparamos una suspensión de estos hematíes al 5 por ciento en solución salina
rótula Moss un tubo de centrífuga con la letra a 1 , otro con la letra A2 otro b . Otro 0 y otro c.
añadimos a cada tubo dos gotas del suero problema inactiva do
depositamos una gota de la suspensión de hematíes que se corresponda con la letra del tubo rotulado
en el tubo C añadimos una gota de la suspensión de los hematíes propios de la sangre problema, ya que nos servirá de control negativo.
agitamos suavemente y centrífugamos a mil revoluciones por minuto durante un minuto.
lectura de resultados
golpeamos suavemente el extremo inferior de los tubos para despegar el sedimento hemático.
si aparecen unos grumos rojos flotando en un líquido claro indica que existe aglutinacion.
en el caso contrario, y los hematíes se suspenden homogéneamente dando lugar a un líquido de color rojizo.
interpretación clínica de los resultados obtenidos
es difícil confirmar el grupo sanguíneo por esta técnica en el caso de los recién nacidos, ya que sus anticuerpos no están bien desarrollados aun.
también encontramos dificultades en los pacientes con agammaglobulinemia ya que carecen de anticuerpos y en aquellos que poseen otros anticuerpos específicos o inespecíficos capaces de reaccionar con los antigenos del grupo ABO.
discrepancias entre la prueba celular y la serica
en el caso de no tener el mismo resultado en ambas pruebas debemos proceder de la siguiente manera
repetir las pruebas
en el caso de persistir la discrepancia, se obtendrá una nueva muestra de sangre y se realizarán ambas pruebas utilizando hematíes lavados y resuspendidoscorrectamente a la concentración óptima de cada técnica.
efectuar una prueba de Coombs directo sobre los hematíes para detectar posibles autoanticuerpos
realizar la prueba sérica utilizando un panel de screening con hematíes a1. A2. B . 0
causas de la discrepancia entre la prueba celular y sérica
las causas más frecuentes obedecen a tres tipos distintos
1 errores técnicos
identificación incorrecta de las muestras o anotación de los resultados
no añadir todos los reactivos y muestras correspondientes
contaminación de los reactivos o hematíes del panel de screening
proporción inadecuada de muestra y reactivos
sobrecentrifugacion o centrifugación insuficiente
no valorar la hemólisis considerándola como aglutinacion negativa
2 problemas con la muestra:
presencia de autoanticuerpos
antígenos a o b débiles
especificidad B adquirida en pacientes A1 por una infección bacteriana
inmunodeficiencias congénitas o adquiridas
hoja de trabajo
1 ¿qué son los hematíes tipaños?
2 ¿a que dilucion empleamos los hematíes del paciente?
3¿qué clase de muestra se emplea en esta técnica?
4¿qué ocurre cuando el tubo c presenta presenta aglaglutinacion?
valoración de los resultados
los anticuerpos encontrados en el suelo son:
anti A1
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