Fundamento
los hematíes problema contienen las sustancias antigénica del sistema ab 0 y se enfrentan a sueros conocidos que posee anticuerpos frente a esos antígenos.
el resultado final es la presencia o no de aglutinacion en los hematíes reaccionantes
material necesario
tubos de centrífuga
rotulador de vidrio
pipetas Pasteur
centrífuga
gradillas
reactivos
suero anti a
suero anti B
suero anti aB
solución salina fisiológica
muestra
sangre total anticoagulada. Para esta técnica es preferible usar una suspensión de los hematíes problema.
técnica
en primer lugar realizamos el lavado de los hematíes problema. Para ello rótulaMos convenientemente un tubo de centrífugay la niña dimos un mililitro de la muestra de sangre. Complementamos el tubo con solución salina agitamos para suspender los hematíes.
centrífugamos 4 minutos a 2000 revoluciones por minuto y le decantamos el sobrenadante
a los hematíes del tubo les añadimos una cantidad suficiente de solución salina como para obtener una suspensión al 2 por ciento. Esto es aproximado, aunque debemos establecer los límites entre el 2 y el 4 por ciento.
rotular tres tubos de ensayo bien limpios con las letras a, By ab.
añadir a cada tubo una gota de la suspensión de hematíes al 2 por ciento.
añadir dos gotas de suero anti a en el tubo a
dos gotas de anti B en el tubo B, y dos gotas de anti a b en el tubo ab
centrífugamos todos los tubos durante un minuto a mil revoluciones por minuto
lectura de resultados
después de centrifugar, golpeamos suavemente el fondo de cada tubo para desprender el sedimento y observar macroscópica mente la presencia o ausencia de aglutinacion
reacción negativa: los hematíes se re suspenden homogeneamente
reacción positiva: se observa un botón de hematíes que permanecen unidos una vez desprendido el sedimento
interpretación clínica de los resultados obtenidos.
se realiza igual que en la técnica en porta.
es importante destacar que los restos de detergente o sustancias extrañas en los tubos pueden ocasionar falsos negativos
también pueden darse falsos positivos, principalmente por dos motivos:
- aglutinacion no especifica se debe a la presencia de ácido hialurónico en la sangre, procedente de la gelatina de Wharton del cordón umbilical . y se elimina añadiendo una gota de hialuronidasa a la suspensión de hematíes
- fenómeno de rouleaux consiste en una agrupación no especifica de hematíes, que adoptan una imagen de pilas de monedas. Las sustancias que más frecuentemente originan en este fenómeno son
el fibrinogeno , el dextrano polivinilpirrolidona.
estos fenómenos pueden evitarse con el lavado previo de los hematíes problema .
Resultados obtenidos:
La sangre ensayada es del grupo eritrocitario:
B
No hay comentarios:
Publicar un comentario