Fundamento
Realizar una determinación cronométrica de fibrinógeno, según el método de von Clauss (se basa en la medición del tiempo que tarda un exceso de trombina en degradar a fibrina el fibrinógeno presente en un PPP diluido y, por tanto, en forma de coágulo).
Material
Material
Gradilla, tubos de ensayo de plástico, micropipeta, puntas de micropipetas, rotulador de vidrio, cubetas de coagulómetro, trocitos de acero para las cubetas, coagulómetro, bolígrafo, hoja milimetrada.
Reactivos:
Reactivos:
- R1 (trombina bovina)
- R2 (tampón imidazol)
- R3 (solución caolín)
- Coagulation cal
Muestra:
- PPP (plasma pobre en plaquetas)
-Preparamos una dilución 1/10 de la muestra y los controles en Tampón Imidazol (0'05 ml de muestra + 0'45 ml de tampón imidazol).
-Preparamos las diluciones del calibrador en tampón imidazol:
-Colocamos 5 trocitos de acero en las cubetas del coagulómetro, perfectamente rotuladas, y le añadimos 0'2 ml de cada dilución y de la muestra, cada uno respectivamente en su cubeta rotulada.
-Añadimpos 0'02 de R3 en cada cubetas y lo atemperamos, en la placa calefactora entre 4 y 6 minutos.
-Vamos introduciendo, consecutivamente, cada una de las cubetas en la celda de medida del coagulómetro y le añadimos 0'1 ml de R1 (sin atemperar).
-Antomos0 los tiempos y realizamos una curva de actividad con las diluciones del calibrador y luego colocamos la muestra.
Los valores normales de la fibrinogenemia oscila entre los 150 mg/dl y los 450 mg/dl. Nuestra muestra está por debajo de esos valores normales (más o menos 58) , que puede deberse a trastornos congénitos a ( fibrinogemia congénita) o adquiridos (hepatopatías).
Hoja de trabajo:
1. ¿De qué tipo es la determinación de fibrinógeno realizada en esta práctica?
Es una determinación funcional de fibrinógeno.
2. ¿A qué concentración esta la trombina bovina?
Está a una concentración de 100 U NIH/ml.
3. ¿A qué dilución se somete a la muestra?
La muestra se somete a una dilución de 1/10.
4. ¿Cuál es la fibrinogenemia normal?
La fribinogenemia normal oscila entre los 150 y los 450 g/dl.
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