PRACTICA XXXIII : Detección de crioglobulinas ()

Fundamento

• Las crioglobulinas son inmunoglobulinas aisladas , o complejos inmunes qu están alterados , esta alteración hace que se vuelvan insolubles  y precipiten en el suero cuando estan expuestas a una temperatura inferior a la normal del cuerp humano ( 37 ºC)  .

• La detección de crioglobulinas se basa en la exposición del suero problema a la acción de una temperatura baja ( unos 4ºC ) es a la tª que las crioglobulinas precipitan más .
• Si el suero problema contiene crioglobulinas , éstas precipitan con el frío , y el precipitado formado adopta partículas blanquecinas .

Material 

• Una pipeta pasteur
• Un  tubo de ensayo
• Una  gradilla 
• Una nevera
• Un baño de agua
• Un capilar de microhematocrito no heparinizado ( capilar azul)
• Plastilina
• Una centrifuga de microhematocrito
• Una regla o un lector de microhematocrito

Muestra  ( tubo seco , sangre roja sin anticoagulante , tubo ----rojo o marrón ) .

• Suero transparente ,obtenido de sangre coaguladacompletamente a temperatura corporal  , y separado del coágulo en un ambiente cálido.
• Es importante evitar que la coagulación se produzca en un ambiente frio , pues esto puede dar lugar a la formación de una peuqeña cantidad de crioglobulinas .

Técnica

• Depositar el suero problema en un tubo de ensallo
• Colocar el suero problema en una nevera entre 4º y 6º .
• Examinar el tubo a los 30 min , y después cada día durante 6 días . 

Lectura de resultados 

•  Si aparecen partículas blanquecinas en el suero , ëste ha de ser incubado a 37 º   C
• Cuando no desaparezcan las partículas tras la incubación , se considera que ésta se debe a restos de fibrina.
• Sin embargo, cuando las partículas desaparecen , se estima que son crioglobulinas precipitadas ( prueba positiva ) .

• El grado de positividad de la prueba puede ser establecido de la siguiente manera :

 

ASPECTO DEL SUERO	GRADO DE POSITIVIDAD
Discretamente turbio	+
Francamente turbio	++
Lechoso	+++

 En el caso de que la prueba sea positiva , puede realizarse una semicuantificación de las crioglobulinas presentes en el suero , mediante la determinación del criocrito .

Esta se mide de la siguiente manera :

1.  Llenar el tubo capilar de microhematocrito con el suero problema , hasta las 3/4 partes de su longitud
2. Sellar con plastilina el extremo del tubo por el que ha entrado el suero .
3. Enfriar en tubo a 4º -6º C , hasta que se produzca la precipitación máxima de crioglobulinas 
4. Centrifugar el tubo a unas 12 000 g durante 5 minutos
5. Calcular el porcentaje que supone la columna de precipitado , con respecto a la columna total del suero.

 El criocrito es , por lo tanto , la relación existente entre el volumen ocupado por el precipitado de crioglobulinas y el ocupado por el suero total , expresado en forma de porcentaje . 


Interpretación clínica de los resultados obtenidos 

• Las crioglobulinas tipo I se asocian a transtornos proliferativos  ( mieloma múltilple ... )
• Las crioglobulinas tipo II pueden ser idiopáticas o secundarias a distintas enfermedades ( transtornos proliferativos ...)
• Las crioglobulinas tipo III suelen estar relacioadas con enfermadades sistémicas y con procesos autoinmunes.

 Las manifestaciones clínicas de las crioglobulinemias se deben a los siguientes fenómenos originados por ellas :

1. Aumento de la viscosidad de la sangre 
2. Preccipitación de las crioglo bulinas
3. Depósito de inmunocomplejos

Hoja de trabajo


  ¿ A qué temperatura se debe someter el suero para una detección de crioglobulinas ?
A una temperatura entre 4º y 6º C 

Si el precipitado no se reabsorbe con color , ¿ de qué sistancia está formado ? 
...

¿Cuántas cruces se le asigna a un suero de aspecto lechoso ?
3 cruces 

 ¿ A qué concentración sérica suele encontrarse las crioglobulinas tipo I ?
Se encuentran en el suero a una concentración de > 5 mg / ml

¿ Qué manifestaciones clínicas puede producir una crioglobulinemia ?
Aumento de la viscosidad de la sangre , precipitación de las crioglobulinas , depósitos de inmunocomplejos .