PRACTICA XIII : Recuento de hematíes RBC ( )

Fundamento

• Para el recuento en cámara de glóbulos rojos , se diluye la sangre problema en un líquido apropiado y posteriormente se deposita en la cámara de recuento , donde se cuentan las células presentes en algunos cuadrados de los retículos 

 

Material necesario

• Una pipeta diluidora de thoma , para recuentom de glóbulos rojos 
• Un tubo de goma con boquilla , adaptable a la pipeta diluidora
• Una cámara de recuento con un retículo de nevauer mejorado
• Un cubre
• Un microscopio 

  Reactivos

•  Líquido de dilución . Este debe ser isotónico con el plasma , para evitar la alteración morfológica e incluso de lisis de hematies .
• El más utilizado es el de Hayem .

 

Muestra 

• Sangre capilar o venosa anticoagulada.

 

Técnica

1. Situar sobre el retículo de la cámara un cubre, humedeciendo la cámara previamente.
2. Aspirar la sangre hasta la señal de 1 
3. Limpiar la pipeta con gasas sin que baje el nivel de la sangre .
4. Aspirar el líquido diluyente hasta la señal de 101
5. Desenganchar el tubo de goma de la pipeta y homogeneizar el contenido del bulbo. Para ello se sujeta la pipeta por sus extremos, con los dedos pulgar e indice , y se agita suavemente en sentido horizontal 2-3 min.
6. Desechar las 3 primeras gotas .
7. Depositar la siguiente gota entre la cámara y el cubre. Se pone una gota por el extremo de la cámara y se deja que suba por capilaridad , evitando que el líquido desborde por el cubre.
8. Dejar reposar la sangre diluida , contenida en la cámara .
9. Enfocar el retículo con el objetivo de 40x y con el condensador a baja altura y ver que la distribución de los hematíes es homogénea.
10. Contar los hematíes presentes en los 4 cuadrados grandes de las esquinas y en el del centro.
11. Al contar tendremos en cuenta los que estén en los bordes arriba y a la derecha. y en zig zag.

 

Lectura de resultados 

• Como se cuentan los hematíes presentes en 5 cuadrados medianos del cuadrado grande central , y éste tiene 25 cuadrados medianos , hay que multiplicar por 5 , la cifra obtenida en el recuento , para calcular el número de hematíes que hay en cuadrado grande .

• Como la longitud de cada uno de los lados  del cuadrado grande  central es de 1mmy la longitud del espacio comprendido entre éste y el cubre es de 0,1mm, hay que multiplicar por 10 el resultado anterior , para saber el numero de hematíes existentes , no en 0,1 mm3 si no en 1mm3.

•  Como la sangre , previamente al recuento propiamente dicho se diluye, hay que multiplicar el resultado anterior por 100 , si se ha partido de sangre entera contenida hasta el enrase de 1 , o por 200 , si se ha partido de la sangre entera contenida hasta el enrase de 0,5 ( para calcular las diluciones realizadas no se tienen en cuenta el líquido contenido en el tubo capilar largo de la pipeta diluidora , pues se considera , que éste no se mezcla con el resto a nivel del bulbo .

 

FORMULA : 

• RBC = H x 5 x 10 x D

RBC = recuento de hematíes ( nº de hematíes por mm3 de sangre )     

          H = hematíes contados en 5 cuadrados medianos
     
          D = factor de dilución ( 100 ó 200 )




Interpretación clínica de los resultados obtenidos

• La disminución del RBC ( glóbulos rojos ) se produce en las anemias y su aumento se da en las policitemias .    

• Se considera normal   un RBC comprendido entre los 4 y los 5,5 millones / mm3 en mujeres 
•  y entre los 4,5 y los 6 millones /mm3 en hombres

Hoja de trabajo

•  ¿ Qué se debe hacer si el liquido de Hayem contiene precipitados ?
• Filtrarlo
• ¿ Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre cada uno de los cuadrados pequeños donde se han contado los hematíes ?
•   0,0625  x 0,0625 x 0,1 = 3,90625 x (10elevado -3 )
• ¿ Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre cada uno de los cuadrados medianos donde se han contado los hematíes ?
• 0,25 x 0,25 x 0,1 = 6,25 x (10elevado3 mm3)
• ¿Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre el cuadrado grande central ?
• 1 x 1 x 0,1 = 0,1 mm3
• Si la pipeta de Thoma se enrasa con sangre hasta la señal de 1 ¿ Cuál es la dilución posteriormente obtenida ?
• 1 : 100
•    Si la sangre se diluye a 1 / 200 y se cuentan 450 hemtíes en 5 cuadrados medianos ¿ Cuál es el RBC obtenido ?
• RBC = H x 5 x 10 x D = 450 x 5 x 10 x 200 = 450 000

Resultados obtenidos

• Hematíes contados en 5 cuadrados medianos ----- 763
• Factor de dilución --------------------------------- 1 : 100
• RBC-----------------------------------------------3 815 000 hematíes / mm3

      Valoración de resultados 

• sexo    masculino
• RBC   Alto