PRACTICA V : TINCION SUPRAVITAL CON AZUL DE METILENO , ( 7-11-14 ) .

Fundamento

•  Vamos a hacer una tinción supravital  ( tejidos vivos aislados del organismo ) , empleando como colorante , azul de metileno , es una sustancia básica de modo , que teñirá los núcleos celulares, que son ácidos .

Material necesario

• Microscopio óptico.
• Portas y cubres.
• Tubos de hemólisis.
• Pipetas pasteur.
• Sellador histológico.
• papel parafilm.

Reactivos

• Azul de metileno.
• Oxalato Potásico.
• Agua destilada.

 

MUESTRA

• Sangre capilar fresca o sangre venosa anticoagulada.

Técnica 

1. Azul de metileno 0,5 g.
2. Oxalato potásico 1.6 g.
3. Agua destilada 100 ml.
4. En un porta depositamos 2 gotas de sangre y dos gotas de colorante ( proporción 1:1 ) y , aspiramos la mezcla con una pipeta pasteur y lo depositamos en un tubo de hemólisis. También se puede preparar directamente en el tubo.
5. Tapamos el tubo con parafilm y dejamos la mezcla en reposo , a temperatura ambiente 10 min.
6. Aspiramos un par de gotas y las colocamos sobre el porta .
7. cubrimos la mezcla con un cubre .

Lectura de resultados

Podemos ver los núcleos celulares teñidos , pero hay que ser rápido porque las células no permanecen vivas mucho tiempo.

Hoja de trabajo.

• ¿ En qué se diferencia una tinción supravital de una vital ? 

          - Vital : El colorante va dentro del organismo.
          - Supravital : El colorante va fuera del organismo , en células o tejidos aislados.

•  ¿ Cuáles son los colorantes vitales más utilizados ?   

          - Verde jano y azul de metileno.

• ¿ Qué tipo de estructuras tiñe selectivamente el verde jano ?

          - Mitocondrias y otros orgánulos celulares .

• ¿ Cuáles son las ventajas de una tinción supravital ?

          - Que se hace fuera del organismo y es más facil de manipular .

•  ¿ Cuáles son los inconvenientes ?

           - Se necesita extraer un tejido.