- El colorante utilizado es una solución de eosina y una mezcla de azul de metileno ( del 50 al 75 % ) y azur B ( del 10 al 25 % ) junto con otros derivados del alcohol metílico .
- Dada la presencia de metanol en la composición del colorante , no es necesario un paso previo de fijación antes de la coloración .
Material necesario
- Microscopio óptico
- Cristalizador
- Puente de tinción
- Pipeta pasteur con chupete
- Frasco lavador
- Guantes
- Tubos de ensayo
Reactivos
- Solución de eosina - azul de metileno según Wright
- Solución tampón pH 7.2
- Aceite de inmersión
Muestra
- Sangre capilar fresca o venosa anticoagulada
Técnica
- Hacer un frotis sanguíneo y lo dejamos secar al aire.
- Ponemos la extensión en el puente de tinción
- .
- Vertemos 1 ml de eosina-azul de metileno.
- Dejamos actuar un minuto y lavamos con solución tampón pH 7,2, y dejamos escurrir en posición vertical.
- Diluimos en un tubo de ensayo 0,5 ml de eosina-azul de metileno , con 0,5 de solución tampón pH 7,2 . Mezclamos bien y lo aplicamos sobre la extensión , dejamos actuar de 3-5 min. Y lavamos con agua destilada .
-
- Dejamos secar y volvemos a lavar con tampón pH 7,2 y dejamos secar verticalmente
Lectura de resultados
- Echamos una gota de aceite de inmersión y observamos con el objetivo de 100 x.
- Las células se observan coloreadas de la misma manera que con la tinción de Giemsa.
Hoja de trabajo
- ¿ Qué tipo de colorante utilizamos en esta tinción ?
- ¿ Qué sustancia empleamos como fijador ?
- ¿ Cuánto tiempo debe estar en contacto el frotis con el colorante diluido ?
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